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细胞培养基础——处理方法

  • 发布日期:2020-09-15      浏览次数:84
    • 一、 贴壁细胞

      接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片, 显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。

      用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的) 。

      严格无菌操作,打开细胞培养瓶。

      将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。

      用PBS 2-3mL轻轻洗细胞表面,洗1-2遍,吸走PBS,加入0.25%胰酶EDTA 1ml,37度培养箱消化,消化到显微镜下观察细胞变圆但未完全脱落时,吸取正在消化的胰酶轻轻吹打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止消化,混匀细胞。

      900rpm, 3min离心,加新的培养基重悬细胞。

      传代换新的细胞培养瓶,放置于37℃,5% CO?的培养箱中培养。

      二、 悬浮细胞

      接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。

      用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。

      严格无菌操作,打开细胞培养瓶。

      细胞培养瓶内的细胞吹打均匀,用吸管将培养基完全吸出(严禁直接倾倒)。

      900rpm, 3min离心,加新的培养基重悬细胞。

      换新的细胞培养瓶和新鲜培养基,放置于37℃,5% CO?的培养箱中培养。
       

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