首页 >> 技术文章 >> 远慕试剂:细菌细胞壁的染色实验

远慕试剂:细菌细胞壁的染色实验

  • 发布日期:2020-11-30      浏览次数:123
    • 细菌细胞壁很薄,革兰氏阳性菌的细胞壁为20~30nm,革兰氏阴性菌的细胞壁为10~13nm。组成细菌细胞壁的主要化学成分是肽聚糖,它与染料结合的能力差,不易着色,在细菌的染色过程中,一般情况染料都是通过细胞壁的渗透、扩散等作用而进入细胞,细胞壁本身并未染色。

      实验方法原理: 根据细菌细胞在高渗溶液中或用乙-醚蒸气处理后,会产生质壁分离这一现象,经染色后也可在普通光学显微镜下区分细胞壁和细胞质膜。

      实验材料 :巨大芽孢杆菌 枯草芽孢杆菌

      试剂、试剂盒:结晶紫水溶液 单宁酸(鞣酸)水溶液 磷钼酸水溶液 甲基绿水溶液 NaCl 结晶紫水溶液 Bouin氏固定液 硫堇水溶液 乙-醚

      仪器、耗材: 乙-醚蒸气瓶

       

       

      实验步骤:

      1.  单宁酸法

      (1)将培养16~18小时的巨大芽孢杆菌按常法制成涂片。

      (2)用5%单宁酸染5分钟后,水洗。

      (3)用0.2%结晶紫染3~5分钟,水洗,吹干。用油镜观察,细胞壁呈紫色,细胞质呈淡紫色。

      2.  磷钼酸法

      (1)制备浓厚的涂片,在未干时浸入1%磷钼酸水溶液3~5分钟。

      (2)用1%甲基绿水溶液染3~5分钟。

      (3)水洗后,吹干,用油镜观察。细胞壁为绿色,细胞质无色。

      3.  区分细胞壁与细胞质膜

      (1)乙-醚蒸气法

      ①将巨大芽孢杆菌涂布于盖玻片上,翻转盖玻片使其放在乙-醚蒸气瓶的瓶口上蒸3分钟。

      ②取下盖玻片置Bouin氏固定液中30分钟后取出,水洗。

      ③用硫堇染色30秒钟。

      ④水洗,水封,置油镜下观察。

      (2)NaCl法

      ①取一滴25%NaCl溶液于洁净的载玻片上。

      ②挑一小环培养6小时的枯草芽孢杆菌,在25%NaCl水滴中涂布均匀,待自然干燥。

      ③滴加0.01%结晶紫于其上,使盖满有菌部分,30秒钟后水洗,干燥,用油镜观察结果。

    网站首页 | 走进我们 | 新闻中心 | 产品中心 | 技术文章 | 联系我们

    地址:上海市嘉定区曹安公路5588号   技术支持:安防展览网   sitemap.xml   

    ©2021 昆山远慕生物科技有限公司版权所有   备案号:苏ICP备2020054465号-1

    在线客服 联系方式 二维码

    服务热线

    021-58999013

    扫一扫,关注我们