首页 >> 技术文章 >> 细菌简单染色实验方法

细菌简单染色实验方法

  • 发布日期:2021-04-21      浏览次数:42
    • 简单染色法是利用单一染料对细菌进行染色的一种方法。此法操作简便,适用于菌体一般形状和细菌排列的观察。


      实验方法原理:
      常用碱性染料进行简单染色,这是因为:在中性、碱性或弱酸性溶液中,细菌细胞通常带负电荷,而碱性染料在电离时,其分子的染色部分带正电荷(酸性染料电离时,其分子的染色部分带正电荷)。因此碱性染料的染色部分很容易与细菌结合使细菌着色。经染色后的细菌细胞与背景形成鲜明的对比,在显微镜下更易于识别,常用作简单染色的染料有:美蓝、结晶紫、碱性复红等。
      当细菌分解糖类产酸使培养基 pH 下降时,细菌所带正电荷增加,此时可用伊红、酸性复红或刚果红等酸性染料染色。


      实验材料 :
      枯草芽孢杆菌 (12-18 h 营养琼脂斜面培养物) 藤黄微球菌(约 24 h 营养琼脂斜面培养物)
      试剂、试剂盒 :
      吕氏碱性美蓝染液/草酸按结晶紫染液 齐氏石-炭酸复红染液
      仪器、耗材 :
      显微镜 酒精灯 载玻片 接种环 双层瓶(内装香柏油和二甲-苯) 擦镜纸 生-理盐水


      实验步骤:
      1. 涂片
      取两块载玻片,各滴一小滴(或用接种环挑取 1~2 环)生-理盐水(或蒸馏水)于玻片中央,用接环以无菌操作(图 IV-1)分别从枯草芽泡杆菌和藤黄微球菌斜面上挑取少许菌苔于水滴中,混匀井涂成薄膜。若用菌悬液(或液体培养物)涂片可用接种环挑取 2~3 环直接涂于载玻片上。
      2. 干燥
      室温自然干燥。
      3. 固定
      涂面朝上,通过火焰 2~3 次。
      此操作过程称热固定,其目的是使细胞质凝固,以固定细胞形态。并使之牢固附着在载玻片上。
      4. 染色
      将玻片平放于玻片搁架上,滴加染液于涂片上(染液刚好覆盖涂片薄膜为宜)。吕氏碱性美蓝染色 1~2 min,石-炭酸复红(或草酸铵结晶紫)染色约 1 min。
      5. 水洗
      倒去染液。用自来水冲洗,直至涂片上流下的水无色为止。
      6. 干燥
      自然干燥,或用电吹风吹干,也可用吸水纸吸干。
      7. 镜检
      涂片干后镜检。


      注意事项:
      1. 载玻片要洁净无油斑,滴生-理盐水和取菌不宜过多,涂片要涂抹均匀。不宜过厚。
      2. 热固定温度不宜过高(以玻片背面不烫手为宜),否剿会改变甚至破坏细胞形态。
      3. 水洗时不要直接冲洗涂面,而应使水从载玻片的一端流下。水流不宜过急、过大,以免涂片薄膜脱落。
      4. 涂片必须完全干燥后才能用油镜观察。

    网站首页 | 走进我们 | 新闻中心 | 产品中心 | 技术文章 | 联系我们

    地址:上海市嘉定区曹安公路5588号   技术支持:安防展览网   sitemap.xml   

    ©2021 昆山远慕生物科技有限公司版权所有   备案号:苏ICP备2020054465号-1

    在线客服 联系方式 二维码

    服务热线

    021-58999013

    扫一扫,关注我们