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实验应该选择原代细胞还是细胞株?区别在哪?

  • 发布日期:2021-06-01      浏览次数:28
    • 原代细胞(primary cell)是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞,称为原代细胞。

      细胞系(cell line)是原代细胞经shou次传代成功后即为细胞系。泛指一般可能传代的细胞。其中能够连续传代的细胞叫做连续细胞系或无限细胞系,不能连续培养的称为有限细胞系。

      大多数细胞系已经经过了数十年的培养,虽然它们还能很好的适应二维培养环境,但这些细胞系通常在遗传学和表型上与其起源组织起源细胞不同,甚至形态有改变。

      然而,原代细胞不存在这些问题,他们通常是直接从组织中分离的、具有有限寿命和有限增值能力的细胞,因此原代细胞拥有正常细胞的形态,并且能够体现出该细胞在生物体内所应该具备的标记和功能。例如内皮细胞系常缺乏各种功能性标志蛋白的表达,而原代内皮细胞具有这些关键特征。

      与细胞系相反,原代细胞是非常敏感的细胞,需要传统培养基之外的额外营养物质。为了优化原代细胞的存活和生长,需要针对每种细胞类型选择特定的培养基。例如,内皮细胞对营养的需求与上皮细胞或神经元有很大区别,因此需要特制的内皮细胞培养基。

      而传统的细胞培养基依靠血清提供生长因子、激素、脂质和其他的未知组分,以支持细胞的生长。但对于原代细胞,高血清水平可导致细胞分化,或促进污染细胞如成纤维细胞的生长。

      此外,添加血清也受到成本上升及不同批次间差异性的困扰。配制具有很少或没有血清的特殊培养基则可以避免这些问题,并且更加有利于促进特定类型原代细胞的生长。而且,其他一些实践,例如在更多的生理学相关底物上接种原代细胞而不是使用合成聚合物,可以显着的促进细胞贴壁、增殖及保持纯度。

      尽管原代细胞可能更难培养,但是使用原代细胞而获得的数据具有更好的相关性,并且更能反映体内环境。

      原代细胞:从体内直接分离的细胞。功能、代谢、形态类似体内细胞的特点,因此原代细胞适用于分析单个细胞形态、代谢、功能。原代细胞的缺点是:细胞均一性差,因为从特定组织取下来的原代细胞可能处于不同的发育时期。增殖能力差、培养时间受限、转染效率低。

      细胞株:原代细胞经过长期培养和筛选后,功能、代谢、形态趋于均一化的无限增殖细胞。适用于整体水平实验。优点是:容易培养、好感染、干扰因素少、便于同步化、实验好操作。缺点是:与整体差别大、可能丧失原代细胞的特性,细胞株在长期传代过程中遗传物质发生变异。所以同一个学名的细胞株,有可能有完全不同的形态、代谢、功能表现。不同代数的细胞株,性质也可能完全不同。

      原代细胞由于转染效率低这个问题,应用受到了限制。自从腺病毒诞生后,因为其超强的感染能力,克服了原代细胞难感染的问题,使得原代细胞的使用变得更加简单。由于细胞实验后,很多时候需要做到动物体内,由于原代细胞有体内细胞的特点,为了细胞实验和动物体内实验的结果更加趋向一致性,因此用原代细胞来进行细胞实验更值得考虑。

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