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灭菌后小倒管内留有气泡怎么解决?

  • 发布日期:2021-01-26      浏览次数:52
    • 大肠菌群、大肠杆菌检测时,所用培养基LST、BGLB、EC肉汤等这些需要用小倒管(杜氏管)考察产气的培养基,灭菌后,偶尔会有小气泡留在小倒管内,导致培养基不能使用。重复灭菌不仅费时,更重要的是会破坏培养基的有效成分。为了避免这类问题的发生,根据实验经验,做出以下几种可能原因分析:

      原因一:高温高压灭菌锅工作压力不够,使气体不能完全排出
      高压锅在灭菌过程中产生的大压力不够,不能将小倒管内的气体挤出,导致灭菌后任留有小气泡。此外,高温高压灭菌锅若是温度上升缓慢或者达不到灭菌温度,也会出现类似现象。
      解决办法:使用检查灭菌效果的用品-压力蒸汽灭菌指示卡,对高温高压灭菌锅的灭菌情况进行监测。

      原因二:试管塞塞得太紧
      在灭菌时,试管塞塞得太紧(有些硅胶塞与试管不配套)会导致试管内压力与灭菌锅内压力不一致。当灭菌锅升温升压时,锅内压力会大于试管内压力,试管内压力不够,不能将小倒管内气体排尽,就留有气泡;当灭菌锅降温降压时,锅内压力小于管内压力,可能会使试管塞和培养基崩出,培养基报废。
      解决办法:改用塑料帽、不锈钢管帽,或者与试管相匹配的硅胶塞。

      原因三:小倒管口太小
      小倒管在加热加压后,一方面液体培养基要进入小倒管,另一方面小倒管内部的空气要被排出,如果小倒管管口太小,液体不容易进去,里面的空气不容易被排出,就会导致有小气泡生成。
      解决办法:改用开口比较大的倒管。
       
      以上提供几种可能形成气泡的主要原因,还有几点建议:
      1.可以在高压锅压力降下来后,温度不太高的时候将培养基从锅中拿出,迅速放在冷水中,急冷,注意要使冷水高度超过试管中液面高度。利用热胀冷缩的原理,可以使小倒管中气泡排出。
      2.若使用非全自动高温高压灭菌锅(此类锅一般需要在100℃手动关闭放气阀),则不要在锅刚达到100℃时就关闭放气阀,可以让高压锅在100℃时多排一会儿热气,这样有助于小倒管中气体排出。
      此外,尽量不要采用将灭菌后的试管颠倒或大角度倾斜的方式,使小倒管内气体排出。此种方法可能会导致培养基通过试管口或试管塞受到污染,或者导致试管内液体流出。

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