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如何鉴定植物细胞的死活?

  • 发布日期:2021-03-29      浏览次数:43
    • 【实验目的】学习用质壁分离法和用活体染色法鉴定细胞死活

      【实验原理】活细胞与死细胞在性质上有许多差别,特别是通透性的变化最-为明显。活细胞的原生质具有选择透过性;而死细胞则为全透性。选择透过性是质壁分离的先决条件。因此能发生质壁分离的细胞就表示是活的,不能发生质壁分离的细胞则说明是死的。

      死活细胞间不仅通透性不同,而 pH 值等情况也不同,它们对某些染料的反应明显不同。某些染料能在活细胞的细胞液中积累,但不能染活的原生质;另一方面,这些染料可使死细胞的原生质染色,但不积累于液泡。所以可根据某些染料活体染色的情况来鉴定细胞死活。

      【实验材料和用具】 洋葱及其它植物材料、酒精灯、显微镜、刀片、镊子、载玻片、盖玻片、 1M 蔗糖、 0.01% 中性红溶液等。

      【实验步骤】

      1 、用质壁分离的方法鉴定细胞的死活。

      撕洋葱表皮细胞滴加 IM 蔗糖中,在显微镜下观察。细胞很快发生质壁分离,这就是细胞活着的证据。另把制取的同样制片,用冷冻、加热、干燥、酒精浸泡等方法将它们的细胞杀死,然后取代上述活材料,做质壁分离实验,结果看到已死的细胞不能发生质壁分离现象。

      用尿素、硝酸-钾、氯化钙溶液等来代替蔗糖,能快速鉴定细胞的死活。

      2 、用活体染色的方法的鉴定细胞的死活。

      取洋葱或其它材料,用镊子撕下表皮(如表皮不易撕下,也可在水中用锋利的刀片轻轻刮去多余部分),或用刀片做成切片若干,将表皮或切片浸入中性红溶液中,放置 5-10 分钟最出用清水浸洗后置于载玻片上,加盖玻片,在显微镜下观察。

      活细胞一般在液泡内染成红色至紫色,原生质不染色,死细胞常呈橙红色,原生质和细胞核被染色。撕破的细胞,只剩细胞壁时,呈淡红色或淡紫色。

      为进一步鉴别细胞的死活,可把玻片上的水溶液吸去,滴一滴 1M 蔗糖溶液,便可观察到活细胞能发生质壁分离,死细胞及空细胞都有没有这种现象。

      可用加热、冷冻或其它方法杀死植物组织,然后用上面所述方法进行处理,比较与活组织有何不同。

       

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